액체 크로마토 그래피 컬럼에서 데드 타임을 계산하는 방법

작가: Bill Davis
창조 날짜: 2 2 월 2021
업데이트 날짜: 19 십일월 2024
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Analysis of HPLC result
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크로마토 그래피는 화학 실험실에서 알려지지 않은 성분의 정체를 확인하기 위해 널리 사용됩니다. 이 구성 요소는 컬럼 포장재를 통해 흐르고 입자와 상호 작용합니다. 입자와 샘플의 구성 요소 간의 상호 작용은 입자 간의 인력 또는 용해도를 기반으로합니다. 외장 재료의 입자와 상호 작용하지 않는 분자는 방해없이 통과 할 수 있습니다. 분자가 비 반응성 분자의 최대 피크에서 주입 지점에서 시스템으로 이동하는 데 필요한 시간은 컬럼의 데드 타임입니다.

1 단계

컬럼 재료에 남아 있지 않은 소량의 화합물로 알려지지 않은 샘플을 강화하십시오. 화합물은 컬럼의 포장재와 상호 작용하지 않고 컬럼을 통과합니다.


2 단계

약 20 마이크로 리터의 샘플을 주사기에로드하고 주사기 바늘을 주입 포트에 삽입합니다. 주사기를 밸브에 비워 밸브에서 샘플 루프를로드합니다.

3 단계

크로마토 그래피 기기를 켜고 이동상을 시작합니다. 이 단계는 기기를 통해 흐르고 컬럼과 폐기물 용기로 끝나는 검출기를 통해 샘플을 가져옵니다.

4 단계

밸브를 활성화하면 샘플이 유체 흐름 경로로 들어갈 수 있습니다. 이렇게하면 샘플 구성 요소가 컬럼 상단에로드되고 분리가 시작됩니다.

5 단계

검출기의 이미 터 신호를 모니터링하고 크로마토 그래프에서 첫 번째 피크를 식별합니다. 강화 성분으로 표시되는 사출 시간과 첫 번째 피크의 최대 값 사이의 차이는 데드 타임입니다.

6 단계

주입 지점과 첫 번째 피크의 최대 높이 사이의 거리를 측정합니다. 데드 타임을 찾으려면 거리에 용지 또는 축의 속도를 곱하십시오.