배양 접시에서 양분 한천 만드는 법

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영양 배지는 Escherichia coli와 같은 세균 배양에 사용됩니다. 이 육즙의 조리법은 세균 종에 따라 다르며 항생제에 대한 내성과 같은 유전 적 변형도 있습니다. 배양액은 박테리아가 독특한 콜로니를 형성하는 것을 허용하는 한천 배지를 첨가함으로써 응고 될 수있는 반면, 액체 배양에서는 단순히 부피를 통해 분산됩니다. 이것은 기본적인 기술이지만, 유전자 복제 나 미생물 학적 분석과 같은 진보 된 방법에 필수적입니다. 이 논문은 대장균의 실험실 계통이 Luria 배지 한천 접시 (또는 페트리 접시)에서 배양 될 것이라고 가정합니다.

지침

페 트리 플레이트 (Jupiterimages / Comstock / Getty Images)

박테리아 트립 톤 10g, 효모 추출물 5g, 염화나트륨 5g, 한천 또는 아가 로스 15g 및 1N 수산화 나트륨 1ml를 측정한다. 멸균 된 오토 클레이브 한 증류수로 1L의 배지를 얻을 때까지 혼합한다. 25 분 동안 병 또는 반자동 플라스크에 담아서 고압 증기 멸균합니다. 항생제 나 다른 영양 보충제와 같이 고열로 파괴 될 수있는 시약을 첨가하기 전에 약 50 ° C로 식힌다.
한천은 부어지기 전에 용기에 달라 붙기 때문에 가압 멸균 된 배지를 50 ° C 이상 45 ° C 이상으로 식히십시오. 멸균 배양 접시를 얻고 전체 표면적과 적어도 깊이의 절반을 덮을 정도로 부어주십시오. 과 주입을 피하고, 한천이 접시의 상단 가장자리에 닿지 않도록하십시오. 뚜껑을 열고 뚜껑의 한쪽 모서리를 남겨두고 멸균 환경 (예 : 층류 챔버 아래)에서 응고 될 때까지 기다리십시오.
접시를 말리십시오. 고체 일 자마자 사용할 수 있지만 한천 표면에 약간의 수분이 존재하여 박테리아의 식민지가 충분히 달라 붙지 않습니다. 따라서 박테리아를 적용하기 전에 플레이트를 건조시키는 것이 좋습니다. 예를 들어 층류 챔버 또는 37 ° C 배양기에서 2,3 일 동안 또는 30 분 동안 실온에서 방치하는 것입니다.
접시를 보관하십시오. 건조 된 판은 거꾸로 (거꾸로) 쌓아서 원래의 포장재에 다시 넣고 테이프로 밀봉하고 빛으로부터 보호하기 위해 호일로 포장하거나 적절한 용기에 넣어 두어야합니다. 접시가 2 개월 이상 된 경우 항상 준비 일을 기록하고 사용하지 마십시오.