C18 컬럼 복원 방법

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고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC)는 혼합물로부터 물질을 분리하는 데 사용되는 도구입니다. 특정 화학 물질의 분리 및 확인은 주로 시스템의 크로마토 그래피 컬럼에서 발생합니다. CLAE에서는 많은 열 유형을 사용할 수 있으며 각 유형은 특정 유형의 분석에 사용됩니다. C18 열은 일반적으로 가장 강한 무극성입니다. 장시간 계속 사용하면 용매를 통과하는 용매의 유속이 감소하고 분석 시간이 증가합니다. 분석 시간을 단축 한 또 다른 이유는 칼럼 물질에 소량의 화학 물질을 남기고 샘플을 분리하는 능력을 감소시키는 샘플을 갖는 것입니다. 표면의 복원은 잔여 샘플에서 닦아내어 뒷면 소재를 재생시키는 여러 가지 특정 용매로 재료를 처리하여 수행 할 수 있습니다.

지침

CLAE의 C18 열 복원 (Jupiterimages / Comstock / Getty Images)

흐름 방향에서 컬럼 C18을 제거하고 반대 방향으로 놓으십시오. 용매를 다시 거 르면 시간이 지남에 따라 축적 효과가 완화됩니다. 기둥 끝 부분에 너무 많은 물질이 쌓이지 않도록주의해야합니다. 일부 공장에서는 상단이 큰 메쉬를 사용하므로 흐름이 방향을 변경하면 메쉬가 아래쪽 위치에있게됩니다. 이 복원 방법을 역전이라고합니다. 시스템 감지기에 누적 된 물질이 흘러 들어가 장해물이 발생하지 않도록 감지기가 연결되지 않은 상태에서 작동하게하고 처리를 위해 기둥의 흐름을 지시하십시오.
용제 통과 튜브를 일련의 용매에 넣고 컬럼에 남아있는 화합물을 반대 방향으로 용리십시오. 이들 용매는 친수성 특성이 다르다. 그것들을 다양 화함으로써 동등하게 분산 된 친수성 성질의 화합물을 용출하게됩니다. 물 (완충 용액을 사용하는 경우), 메탄올, 이소프로판올, 디클로로 메탄, 헥산, 디클로로 메탄 및 이소프로판올 각각 50ml를 연속하여 사용하십시오.
컬럼을 올바른 방향으로 교체하고 용제가 흐르게하십시오. 진행하기 전에 적어도 75 ml를 사용하여 씻으십시오. 새로운 패턴 일 때 사용했던 패턴으로 테스트 해보고 결과를 확인하십시오. 최대 보존 지점과 전체 분석 시간에 도달하면주의를 기울이십시오. 이러한 속성이 아직 초기 상태 일 때 초기 속성과 일치하는 정도는 열이 복원 된 정도를 나타냅니다. 결과가 만족스럽지 않으면 칼럼을 새 칼럼으로 교체하고 이전 칼럼을 버리십시오.