![안동과학대학교 캡스톤디자인 [인터페론 전기영동 및 성분분석]](https://i.ytimg.com/vi/qZGZK1U8znQ/hqdefault.jpg)
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전기 영동 기술은 크기에 따라 DNA 분자를 분리합니다. 유사한 단백질 기술은 크기 나 전하에 따라 단백질을 분리 할 수 있습니다. 두 경우 모두, 분자가 이동하는 겔은 pH를 안정화시키는 작용을하는 완충 용액을 사용하여 준비됩니다. 뚜껑은 전기 영동에서 몇 가지 중요한 역할을 수행합니다.
현재
전기 영동 젤은 완충액에 잠긴 젤 플레이트에 전류를가함으로써 작동합니다. DNA 분자는 음전하를 띠며, 먼저 단백질을 변성시킨 다음 나트륨 도데 실 설페이트 (SDS)로 처리하여 음전하를 띠게됩니다. 단백질 또는 DNA 분자는 음으로 하전 된 음극에서 양전하의 양극으로 이동합니다. 그러나 물은 전기가 흐르면서 전하가 이동함에 따라 전류가 효과적으로 흐르게됩니다. 완충액은 이온 농도가 높기 때문에 (이온 강도가 높아) 순수한 물보다 훨씬 많은 전류를 전달할 수 있습니다.
PH 변화
pH는 수소 이온의 농도를 측정합니다. pH의 변화는 단백질 또는 DNA와 같은 분자의 순 전하를 변화시켜보다 느린 (또는 더 빠른) 이동을 유발할 수 있습니다. 왜냐하면이 분자는 수소 이온 (양성자)을 받아들이는 기본 부분과 양성자를 기증 할 수있는 많은 산성 부분을 가지고 있기 때문입니다. 산이 양성자를 기증하면 음전하가됩니다. 기지가 양성자를 받아들이면 반대로 양성 반응을 보입니다. 용액에서 수소 이온의 농도가 증가함에 따라, 단백질과 DNA는 음으로 하전 (또는보다 양전하)이 적어진다. 단백질과 같은 분자가 전하를 띄지 않는 pH를 등전점이라고합니다. 완충액은 DNA가 음전하를 띄는 수준에서 겔 내의 pH를 안정화시키고 원하는대로 이동시킬 것이다.
스태킹 젤
완충액은 SDS-PAGE 또는 sodium dodecyl sulfate, 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동이라고하는 일종의 전기 영동에서 훨씬 더 복잡한 역할을합니다. 이것은 단백질 분석을위한 가장 일반적인 기술 중 하나입니다. 그들은 열처리에 의해 변성되고 나트륨 도데 실 설페이트로 코팅되고 그 다음에 만 일반적으로 수직으로 움직이는 겔에 첨가됩니다. 젤은 두 개의 영역을 가지고 있는데 하나는 쌓아 올리는 부분 (위쪽 부분에있는 부분)과 아래쪽 부분에있는 부분입니다. 스태킹 겔은 pH가 런 젤의 pH보다 낮도록 다른 완충액으로 제조되며, 또한 이온 강도가 더 작습니다. 이 두 가지 요인은 단백질 쌓기를 일으키기 때문에 동시에 진행중인 젤에 들어갑니다. 이 효과는 크기에 따라 젤의 단백질 분리를 보장합니다.
캡 DNA 전기 영동
DNA 겔 전기 영동을위한 가장 일반적인 두 가지 버퍼는 트리스 - 아세테이트 EDTA와 트리스 - 보레이트 EDTA입니다. EDTA는 에틸렌 디아민 테트라 아세트산을 의미합니다. 이것은 마그네슘 이온의 킬레이트 제 (chelator) 역할을하기 때문에 중요합니다. 이러한 이온은 DNA를 파괴하는 DNA 라 불리는 효소에 필수적인 보조 인자이기 때문에 완충액에있는 EDTA는 DNA에 대한 모든 문제를 예방하기위한 추가 예방책으로 사용됩니다.